Pro ligation-Free Cloning Kit 全克隆试剂盒可以将多个DNA片段一步组装到载体中。 DNA片段可以通过15-25bp的同源片段无缝连接, 无需受到有无互补的限制酶切割位点限制。 因此, 推荐使用这种简单且适用性广的方法快速高效的完成一些具有复杂结构的克隆。
与传统克隆相比的优势:
1.通过一步法快速地将最多6个片段整合进一个载体
→取代了耗时又复杂的传统克隆方法
2. 可 以无缝地将插入片段克隆到任何载体的任何位点
→ 克隆产物没有多余的碱基对
→ 消除了克隆载体对有无互补的限制性内切酶位点的受限性
试剂盒的改进:
1.通过一步法完成强力连接
→使用ProligalionFree试剂盒对困难的以及多个片段进行有效克隆
2.使用增强连接剂(AssemblyEnhancer)进行更快更可靠的克隆
→消除了耗时的凝胶回收或柱纯化等步骤
3.调整了酶最适反应温度,提高了在炎热环境下连接效率的稳定性。
→消除了必须在冰上反应的严苛温度要求,实验更方便

图1.使用Pro ligation-Free Cloning Kt全克隆试剂盒对多个插入片段无缝克隆连接的工作流程图
2. 试剂盒组成
| 组分号 | 组分 | 20反应 | 50反应 |
| W1086-1 | 2X Pro ligation-Free全克隆预混液 | 200ul | 500ul |
| W1086-2 | 阳性对照插入片段 | 4ul | 4ul |
| W1086-3 | 阳性对照载体 | 16ul | 16ul |
| W1086-4 | Assembly Enhance连接增强剂 | 10ul | 25ul |
| W1086-5 | cloning Optimizer克隆优化剂 | 20ul | 50ul |
3.保存条件
保存在-20°℃, 在适宜的条件下可稳定保存一年。 2X Pro ligation-Free Cloning 混合液,连接增强剂(Assembly Enhancer)和克隆增强剂(Cloning Optimizer)在使用
时应放于冰上并避免反复冻融。
产品介绍
常见问题
相关产品