产品介绍一步法 PAGE 凝胶制备试剂盒
One-Step PAGE Preparation Kit
One-Step PAGE Preparation Kit 采用独特的上层胶和下层胶的预混配方，使用时仅需加入小体积的促凝剂
即可凝胶。灌入下层胶后，无需液封，可直接灌入上层胶，实现聚丙烯酰胺凝胶的简便快速制备。本产品所配的上层
胶带有颜色（7.5%-绿色、10%-蓝色、12.5%-红色、15%-紫色），方便点样和区分不同凝胶。
储存条件
本产品常温运输，其中改良型促凝剂 -20℃保存，其他组分 4℃保存，产品保质期 12 个月；
产品特点
◆ 一步法灌胶：灌制下层胶后直接注入上层胶，无需液封；
◆ 上样方便：彩色上层胶，点样孔清晰易辨，方便点样；
◆ 配胶快捷：短时间灌制多块凝胶，无需计算所需溶液量（1:1 混合），无需稀释；
◆ 条带清晰：小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰；
◆ 避免异味：无需使用 TEMED，避免恶臭气味。
产品规格
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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PG0107 |
One-Step PAGE Preparation Kit(7.5%) |
125gels/0.75mm（92gels/1.00mm,62gels/1.50mm） |
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PG0110 |
One-Step PAGE Preparation Kit(10%) |
125gels/0.75mm（92gels/1.00mm,62gels/1.50mm） |
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PG0112 |
One-Step PAGE Preparation Kit(12.5%) |
125gels/0.75mm（92gels/1.00mm,62gels/1.50mm） |
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PG0115 |
One-Step PAGE Preparation Kit(15%) |
125gels/0.75mm（92gels/1.00mm,62gels/1.50mm） |
产品组成
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组分 |
125gels/0.75mm |
储存条件 |
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下层胶溶液 |
250 ml |
4℃ |
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下层胶缓冲液 |
250 ml |
4℃ |
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上层胶溶液 |
80 ml |
4℃ |
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彩色上层胶缓冲液 |
80 ml |
4℃ |
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改良型促凝剂 |
8ml |
-20℃ |
实验方法（以制备一块 0.75/ 1.0/ 1.5 mm 的 mini 胶为例）
1. 取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液，各 2.0/2.7/4.0ml，混匀；
2. 取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液，各 0.5/0.75ml/1.0ml，混匀；
注意：由于染料的特殊理化性质，彩色上层胶缓冲液使用前请摇匀。
3. 向步骤 1 的混合溶液中加入 40/60/80μl 的改良型促凝剂，轻轻混匀，将混匀后的溶液注入制胶玻璃板中；
4. 向步骤 2 的混合溶液中加入 10/15/20μl 的改良型促凝剂，轻轻混匀，无需等待下层胶凝固，即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中，插入梳齿；
注意：（a）灌注上层胶溶液一定要轻缓，避免将上层胶溶液冲入下层胶。（b）如果觉得配制困难，也可选择灌制
下层胶后用 ddH2O 或醇封闭，待下层胶凝固后再灌注上层胶。
5. 待胶凝固后(约 15 min)，拔去梳齿即可用于电泳。
注意：（a）各品牌电泳胶板尺寸略有不同，第一次使用时需根据实际情况确定试剂的最佳使用量；（b）胶凝固后
上下层胶分界线平整度略弱于传统方法配的胶，但对后续电泳没有影响；（c）推荐电泳电压为 150 - 200 V，待溴酚蓝指示剂到达底部边缘时即可停止电泳。
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上层胶配方 |
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凝胶厚度 |
上层胶溶液 |
彩色上层胶 |
改良型 |
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0.75 mm |
0.5ml |
0.5ml |
10μl |
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1.0mm |
0.75ml |
0.75ml |
15μl |
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1.5mm |
1.0ml |
1.0ml |
20μl |
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下层胶配方 |
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凝胶厚度 |
下层胶溶液 |
下层胶 缓冲液 |
改良型 |
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0.75mm |
2.0 ml |
2.0 ml |
40μl |
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1.0 mm |
2.7ml |
2.7ml |
60 μl |
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1.5mm |
4.0ml |
4.0ml |
80 μl |
注意事项
1. 丙烯酰胺具有神经毒性，请穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。
3. 改良型促凝剂的使用量仅作参考，实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。加入较多量的促凝剂可加速凝胶，反之
亦然。
4. 凝胶速度与温度有正相关性。同等条件下，温度越高，凝胶速度越快，室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量；
相反，如果室温较低，可适当延长凝胶时间。
5. 本产品已加入适量 TEMED 的替代品，如需进一步加速凝胶，临配胶前可按需补充适量 TEMED。
6. 在配胶之前，使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟)，可有效避免凝胶中气泡的形成。
常见问题
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