PEI Transfection Reagent
产品简介:
使用方法: DNA的转染 以 6
线性化聚⼄烯亚胺 PEI 转染试剂是⼀种⾼电荷阳离⼦聚合物,⾮常容易结合带负电荷的核酸分⼦,形成复合物, 并使该复
合物进⼊细胞中。该转染试剂是⼀种瞬时转染试剂,细胞毒性低,转染效率⾼,在 HEK293 和 CHO 等细胞中基因表达效率较
⾼。⽬前已经验证线性 PEI 转染试剂⼴泛适⽤于多种细胞系包括 HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3
、Sf9、HepG2 和 Hela 细胞等。该试剂与含⾎清的培养基兼容,能⾼效的将核酸导⼊细胞。
产品储存: 密封⼲燥避光,4 °C 保存 1 年。
孔板为例
【注】:⽆⾎清稀释液建议采⽤ Opti-MEM 或 ddH2
1.接种细胞:为了提⾼转染效率,建议在转染前⼀天接种细胞,以转染时细胞密度在 70%~80%为宜。
2.准备 DNA-PEI 复合物:按照以下体系配制 DNA-PEI 核酸-转染试剂复合物:
1) 对于每孔细胞,使⽤ 100 μL ⽆⾎清培养基稀释 2 μg ⽬的DNA ,充分混匀成 DNA 稀释液。
O
2) ⽴刻向 100 μL 的 DNA 稀释液中加⼊ 5 μL 的PEI转染试剂,旋涡 10 秒,充分混匀。
3) 在室温下孵育 10~25 min,使得形成 DNA-PEI 阳离⼦核酸转染试剂复合物。
3.转染细胞:
1) 在形成复合物过程中,移除细胞⽣⻓培养基,每孔中加⼊ 2 mL 新鲜预热的完全培养基。
2) 直接将 100 μL DNA-PEI 核酸-PEI 复合物加⼊细胞中,摇动培养板,轻轻混匀。
3)37 ℃,5% CO2 培养箱培养,转染后最快 7 h 即可检测到转⼊基因的表达。请⾃⾏确定适合检测时间。
4.稳转筛选(可选)
转染 24 h 后,将细胞传代⾄新鲜的⽣⻓培养基中(将细胞稀释 10 倍以上),37 ℃,5% CO2 培养箱孵育过夜。第⼆天
加⼊与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的⽣⻓培养基。
不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

注意事项
1) 配置好的 PEI 溶液从-20 ºC 拿出融化后,可放在 4 ºC 冰箱保存,绝不可重新冻存。
2) 对大多数细胞每1μg DNA用3.0 μL PEI 转染试剂。也可以1μg DNA 使用1.5~4μL PEI 转染试剂进行优化。
3) 本公司所有产品仅限于专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅。
4) 本公司所有产品必须由合格专业技术人员操作同时佩戴口罩/手套/实验服并遵守生物实验室安全操作规程!
产品介绍
常见问题
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