ProfeLipo3000转染试剂
产品货号:L3000
产品规格:0.75ml 1.5ml
产品简介:
ProfeLipo3000 转染试剂采用了先进的脂质纳米颗粒技术,实现绝佳转染性能和可重复性的结果。其可针对最广泛类型的常见及难转染细胞,实现超高转染效率,同时提供更高的细胞活力。ProfeLipo3000 转染试剂性质温和,毒性低,优化了转染过程的全部四个步骤,并结合先进的脂质纳米颗粒技术。绝佳的转染性能可以降低所需的试剂量,并降低所有可能对您的细胞系产生毒性的风险。对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率,转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
适用范围: 贴壁细胞和悬浮细胞(哺乳动物细胞系) 的转染。
保存条件:2-8℃保存一年(避免冷冻)。
产品组分:
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产品组分 |
规格 |
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L3000-0.75ml |
L3000-1.5ml |
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ProfeLipo3000-1 |
0.75 mL |
1.5 mL |
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ProfeLipo3000-2 |
0.75 mL |
1.5 mL |
使用方法(仅供参考):
一、DNA 的转染:(具体用量参照下表)
对于大多数细胞,转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平 ,并能减少细胞毒性。
1 .接种细胞至 70-90%汇合度时转染。
2 .配制 ProfeLipo3000-2 稀释液:使用减血清培养基稀释ProfeLipo3000-2试剂(建议用 2 管),充分混匀。
注:初次使用建议稀释 2 管,ProfeLipo3000-2 试剂的用量加倍,根据转染效果确定 ProfeLipo3000-2 的最佳用量。
3 .配制 DNA 稀释液: 使用减血清培养基稀释 DNA ,制备 DNA 预混液,然后添加 ProfeLipo3000-1 试剂 ,充分混匀。
4 .在每管 ProfeLipo3000-2 稀释液中加入 DNA 稀释液(1:1 比例)。
5 .室温静置孵育 5-15 分钟。
6 .将以上 DNA-脂质体复合物加入至含细胞培养基的细胞中(在血清/抗生素存在或不存在时均可) ,37℃孵育细胞 2~4 天。
二、siRNA 的转染:(具体用量参照下表)
转染 siRNA 至细胞中时,遵循如上所述的 DNA 实验方案 ,但在稀释 siRNA 时不要加入ProfeLipo3000-1 试剂(第 3 步)。
不同细胞培养板中转染时培养基、 核酸及 ProfeLipo3000 用量:
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细胞培养容器 |
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96-well |
24-well |
6-well |
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细胞数量 |
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1-4×l0⁴ |
0.5-2×105 |
0.25-1×l06 |
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减血清培养基稀释 ProfeLipo3000-2 试剂(建议用 2 管) |
减血清培养基 |
5μL×2 |
25 μL×2 |
l25 μL×2 |
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ProfeLipo3000-2 |
0. 15 和 0.3 μL |
0.75 和 1.5 μL |
3.75 和7.5 μL |
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减血清培养基稀释 DNA,制备 DNA 预混液,然后添加ProfeLipo3000-1 试剂 ,充分混匀 |
减血清培养基 |
10μL |
50 μL |
250 μL |
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DNA(0.5-5 μg/μL) |
0.2 μg |
1 μg |
5 μg |
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ProfeLipo3000-1试剂 (2 μL/ug DNA) |
0.4 μL |
2 μL |
10 μL |
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ProfeLipo3000-2 试剂中加入稀释的 DNA(1:1) |
稀释的 DNA |
5μL |
25 μL |
125 μL |
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稀释的 ProfeLipo3000-2 |
5 μL |
25 μL |
125 μL |
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室温孵育 5-15 分钟 |
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加入 DNA-脂质体复合物至细胞中 |
DNA-脂质体复合物 |
10 μL |
50 μL |
250 μL |
注意事项:
1 、本产品不可冷冻;
2 、本产品仅限于专业人员的科学研究用 ,不得用于临床诊断或治疗 ,不得用于食品或药品;
3 、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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