本试剂盒以JC-1为特异性荧光探针,可快速、灵敏检测细胞及纯化线粒体的膜电位(ΔΨm)变化,是细胞早期凋亡检测的专用试剂盒,操作简便、检测灵敏度高、实验重复性好。
JC-1作为线粒体膜电位检测的理想探针,其荧光特性随线粒体膜电位水平呈电势依赖性改变:在线粒体膜电位较高时,JC-1聚集于线粒体基质形成聚合物(J-aggregates),产生红色荧光;当线粒体膜电位降低时,JC-1无法聚集,以单体(monomer)形式存在于胞浆,产生绿色荧光。可通过荧光颜色的直观转变定性判断线粒体膜电位变化,亦可通过红绿荧光强度的相对比例,精准定量衡量线粒体的去极化程度。线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,本试剂盒可通过JC-1红、绿荧光的转换,高效实现细胞早期凋亡的快速检测;同时配套提供FCCP(碳酰氰-4-三氟甲氧基苯肼)——线粒体电子传递链专用解偶联剂,作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照,为实验结果的准确性提供可靠参考。
储存条件
-20℃避光保存,尽量避免反复冻融,冰袋运输,有效期1年。超纯水和JC-1染色缓冲液(5×)也可4℃保存。
数据展示

图1 JC-1染色检测FCCP处理后HeLa细胞线粒体膜电位变化
注意事项
1.JC-1(200×)在4℃、冰浴等低温条件下易凝固,粘于离心管管底/管壁/管盖,使用前可在20~25℃水浴温育片刻,至完全融解后再稀释,融解后轻轻混匀。
2.FCCP为线粒体电子传递链抑制剂,具有毒性且易挥发,操作时需在通风橱内进行;穿实验服、戴一次性手套和口罩,避免直接接触皮肤、吸入或误食;若不慎接触,立即用大量清水冲洗接触部位。
3.所有染色步骤及样品保存均需避光操作,避免荧光淬灭;JC-1染色工作液现配现用,不可久置,配制后1h内完成染色。
4.用1×染色缓冲液洗涤细胞时,需保持缓冲液在4℃左右(冰浴),可提高洗涤效果,减少非特异性染色;洗涤操作动作轻柔,避免细胞脱壁(贴壁细胞)或破裂(悬浮细胞)。
5.JC-1探针装载并洗涤后,需在30分钟内完成所有荧光检测,检测前样品置于冰浴保存,避免线粒体膜电位发生人为改变,影响结果准确性。
6.请勿将JC-1染色缓冲液(5×)全部配制成1×缓冲液,本试剂盒中染色工作液的配制需直接使用5×原液。
7.本试剂盒所有组分均为科研专用试剂,不可用于人体或动物活体实验,试剂盒开封后请在有效期内使用。
产品介绍
常见问题
相关产品